在病毒感染初期，初始T細胞增殖分化為效應(yīng)T細胞，興致高昂地前去整治那些病原體。然而，隨著慢性感染或腫瘤持續(xù)存在，由于長期暴露于持續(xù)的抗原刺激，效應(yīng)T細胞也開始“麻木”，發(fā)生T細胞耗竭。耗竭T細胞毒性衰減、分泌細胞因子減少、多種抑制性受體（PD-1、TIM-3、 LAG-3）高度表達，細胞代謝、轉(zhuǎn)錄因子表達情況發(fā)生改變。雖說這樣本意是防止過度**反應(yīng)介導(dǎo)的組織損傷，但同時也拿病毒和腫瘤的持續(xù)侵害沒啥辦法[1]。
這次，澳大利亞墨爾本大學的Axel Kallies教授與德國慕尼黑大學的Veit R. Buchholz博士合作，就在這群工作麻木的T細胞中找到了PD-1抑制劑**中的強大戰(zhàn)力——CD62L+前體耗竭T細胞（TPEX）[2]。
他們發(fā)現(xiàn)，當慢性病毒感染或癌癥引發(fā)T細胞耗竭時，CD62L+TPEX細胞仍具有長期增殖潛力、多能性以及再生能力，表現(xiàn)出干細胞樣特性；同時，CD62L+TPEX還決定著****療效，使用PD-1抑制劑**后，CD62L+TPEX增殖爆發(fā)。轉(zhuǎn)錄因子MYB對于這種T細胞亞群的發(fā)育和功能至關(guān)重要。
近年來一些研究表明，耗竭T細胞具有異質(zhì)性，可分為前體耗竭T細胞（TPEX）和終末耗竭T細胞（TEX）。其中，在慢性病毒感染和腫瘤發(fā)展期間，TPEX細胞毒性功能尚未喪失，并且有證據(jù)指出，TPEX細胞或決定PD-1抑制劑****的效果[1]。
為探清TPEX的老底兒、給癌癥****尋個新出路，Axel Kallies教授和Veit R. Buchholz博士等人展開此次研究。
利用慢性病毒感染（LCMV-Cl13）的小鼠模型以及單細胞RNA測序（scRNA-seq）等技術(shù)，他們將TPEX細胞進一步分為CD62L+、CD62L-兩種亞群，均以Tcf7和Id3高表達為標志。其中，在CD62L+TPEX細胞中特異性高表達的基因大多數(shù)與初始T細胞、中央記憶型T細胞相關(guān)，包括Sell（編碼 CD62L）、Ccr7、S1pr1、Lef1、Satb1和Bach2；而在CD62L-TPEX細胞中，Sell基因低表達，Icos、Xcl1、Cxcl10、Cd28和Eomes高表達。
接下來，研究者們尋到了蛛絲馬跡。
他們采用Slingshot工具分析scRNA-seq的數(shù)據(jù)，推斷出TPEX細胞分化結(jié)構(gòu)和順序，再用RNA速率分析進行驗證。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CD62L+TPEX細胞可分化為CD62L-TPEX以及TEX（CX3CR1+/CX3CR1-）細胞，且分化具有單向性。
不僅如此，在小鼠體內(nèi)實驗中，研究者們也是僅在CD62L+TPEX細胞中觀察到了干細胞特性。不同于CD62L-TPEX和TEX細胞，CD62L+TPEX細胞與初始T細胞類似，顯示出優(yōu)異的再生能力和多能性，能夠有效地自我更新并產(chǎn)生CD62L-TPEX和TEX細胞。即使將其在小鼠模型中重復(fù)過繼轉(zhuǎn)移之后，這些特征也得以保持。
繼續(xù)深挖CD62L+TPEX的秘密，研究者們找到了轉(zhuǎn)錄因子MYB。
MYB在造血干細胞、癌細胞以及T**細胞白血病、記憶CD8+T細胞的自我更新中都具有重要意義[3-6]。在這里，研究者們發(fā)現(xiàn)其編碼基因Myb在CD62L+TPEX細胞中高度富集，在慢性病毒感染期間，強烈且持續(xù)的抗原刺激有助于CD62L+TPEX細胞中MYB的持續(xù)性表達。
隨后的小鼠體內(nèi)實驗以及一系列轉(zhuǎn)錄組學分析結(jié)果表明，MYB表達缺陷時，CD62L+TPEX細胞就會“迷失自我”，終末分化加速，TPEX相關(guān)特性及其獨特的干細胞樣特性丟失，細胞遷移以及**結(jié)歸巢行為也會受到影響。換句話說，MYB轉(zhuǎn)錄因子決定著CD62L+TPEX細胞的正常發(fā)育，并抑制其終末分化的進展。
從轉(zhuǎn)錄水平上看MYB缺陷對于耗竭T細胞的影響
值得注意的是，研究結(jié)果強調(diào)，MYB轉(zhuǎn)錄因子正是通過調(diào)節(jié)T細胞的功能與壽命，來幫助T細胞調(diào)整防御姿態(tài)以面對慢性病毒感染，防止出現(xiàn)**損傷。如果T細胞中Myb基因缺失，小鼠將死于慢性病毒感染，而急性病毒感染無明顯影響。這意味著，由MYB轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的T細胞耗竭，是機體適應(yīng)于慢性感染的必要現(xiàn)象。
看來，就算是T細胞，在長期工作中適當麻木點兒也很重要
除了負責給耗竭T細胞這個大**增添新成員，CD62L+TPEX細胞還在PD-1抑制劑**中進行“瘋狂輸出”。
研究者發(fā)現(xiàn)， 使用PD-1抑制劑**后，CD62L+TPEX細胞依舊保持自我更新，同時出現(xiàn)增殖爆發(fā)的現(xiàn)象，數(shù)量明顯擴增。相比之下，CD62L-TPEX和TEX細胞均未表現(xiàn)出明顯的增殖反應(yīng)。如果小鼠T細胞的MYB轉(zhuǎn)錄因子表達缺失，則會導(dǎo)致CD62L+TPEX細胞發(fā)育及功能異常，無法響應(yīng)于PD-1抑制劑進行擴增。
總體來說，Axel Kallies教授和Veit R. Buchholz博士等人找到了一種具有**的增殖和發(fā)育潛力的T細胞亞群，對PD-1抑制劑反應(yīng)強烈。
一方面，CD62L+TPEX細胞表現(xiàn)出干細胞特性，對于抵抗慢性病毒感染以及癌癥的機體**反應(yīng)至關(guān)重要，其細胞內(nèi)表達的MYB轉(zhuǎn)錄因子是維持這種T細胞亞群發(fā)育和功能的關(guān)鍵點。另一方面，依賴于MYB，CD62L+TPEX細胞響應(yīng)PD-1抑制劑后會發(fā)生大量擴增。
對于這一研究成果，研究者們將CD62L+TPEX形容為耗竭T細胞的“青春活力之泉”[7]，不斷給這些長期戰(zhàn)斗的T細胞注入新的血液，并稱之為干細胞樣耗竭T細胞（TSLEX）。并提出，這項研究從有趣、新穎的角度解讀T細胞活化，可能為**療法開發(fā)新思路。
